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TM 1475 – LB Broth (Lennox) – Meio nutritivo para propagação e manutenção de E. coli
O LB Broth (Lennox) TM 1475 é um meio líquido amplamente utilizado para o cultivo, propagação e manutenção de *Escherichia coli*, especialmente cepas recombinantes derivadas de *E. coli* K12 utilizadas em biologia molecular, clonagem gênica e transformações plasmidiais.
Formulado para atender microrganismos com alta demanda nutricional, o LB Broth (Lennox) favorece o crescimento robusto de cepas auxiliares e transformadas, permitindo expressão eficiente de plasmídeos, inclusive genes de resistência a antibióticos. Sua concentração de sais é intermediária entre as formulações LB Miller e LB Luria, permitindo otimizar o cultivo para diferentes linhagens e aplicações.
Características Técnicas
Triptona: 10 g/L
Extrato de levedura: 5 g/L
Cloreto de sódio: 5 g/L
Meio líquido nutriente para E. coli
Adequado para cultivos transformados contendo plasmídeos
Pode ser suplementado com antibióticos Concentração de sais intermediária (Lennox)
Princípio de Funcionamento
A triptona fornece aminoácidos, peptídeos, vitaminas e minerais essenciais ao crescimento bacteriano. O extrato de levedura é rico em vitaminas do complexo B, fundamentais para cepas de E. coli modificadas e deficientes em síntese vitamínica. O cloreto de sódio mantém o equilíbrio osmótico e auxilia no transporte celular. O suplemento opcional com antibióticos permite seleção de plasmídeos transformados.
Aplicações
– Cultivo geral de Escherichia coli recombinante
– Crescimento de linhagens K12 e derivadas
– Propagação de células transformadas contendo plasmídeos
– Expressão de genes de interesse e proteínas recombinantes
– Preparação de culturas para extração plasmidial
– Pré-crescimento para plaqueamento em meios seletivos
– Procedimentos de biologia molecular, como clonagem e transformação
Modo de Preparo
Dissolver 20 g do meio em 1000 ml de água purificada ou destilada Aquecer e agitar até dissolução completa Ferver por 1 minuto para solubilização total Distribuir em frascos ou tubos apropriados Esterilizar em autoclave a 121 °C por 15 minutos Adicionar antibióticos após resfriamento, quando necessário.
FAQs
1. Qual a diferença entre LB Lennox, LB Miller e LB Luria?
O LB Lennox possui concentração intermediária de NaCl, permitindo melhor adaptação a diferentes cepas.
2. O LB Broth é seletivo?
Não, somente se suplementado com antibióticos específicos.
3. Pode ser usado para expressão de proteínas recombinantes?
Sim, é um dos meios mais utilizados para indução e expressão plasmidial.
4. É adequado para preparações de plasmídeos?
Sim, promove crescimento robusto e alto rendimento celular.
5. Quando devo adicionar antibiótico?
Somente após esterilização e resfriamento do meio para evitar degradação térmica.
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