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Proteinase K – Alta atividade enzimática e ampla especificidade para aplicações em biologia molecular
A Proteinase K é uma protease de serina pertencente à família das subtilisinas, reconhecida por sua elevada atividade catalítica e ampla especificidade de substrato. Capaz de degradar ligações éster e peptídicas próximas ao C-terminal de aminoácidos hidrofóbicos, contendo enxofre ou aromáticos, essa enzima é amplamente utilizada em protocolos laboratoriais que envolvem digestão proteica e purificação de ácidos nucleicos.
Apresenta a tríade catalítica Asp39-His69-Ser224, típica das proteases de serina, e dois sítios de ligação de cálcio (Ca²⁺) próximos ao centro ativo, o que confere excelente estabilidade e manutenção da atividade enzimática mesmo em condições rigorosas de trabalho.
Características Técnicas
Alta atividade enzimática e ampla especificidade de substrato
Pertencente à família das subtilisinas (protease de serina)
Tríade catalítica Asp39-His69-Ser224
Dois sítios de ligação de Ca²⁺ que aumentam a estabilidade
Mantém atividade em ampla faixa de temperatura e pH
Utilizada para degradação de proteínas e geração de peptídeos curtos
Compatível com diversos protocolos de extração de DNA e RNA.
Aplicações
Kit de diagnóstico genético
Kit de extração de RNA e DNA
Extração de componentes não proteicos de tecidos e degradação de impurezas proteicas, como em preparações de vacinas de DNA e heparina
Preparação de DNA cromossômico para eletroforese de campo pulsado
Western Blot
Desenvolvimento e produção de reagentes de albumina glicosilada enzimática para diagnóstico in vitro.
Vantagens
Enzima altamente estável e ativa em diferentes condições experimentais
Alta eficiência na digestão de proteínas e remoção de contaminantes
Indispensável em protocolos de purificação de ácidos nucleicos
Proporciona DNA e RNA livres de proteínas residuais
Ideal para aplicações de pesquisa e diagnóstico molecular.
Modo de Uso
Utilize conforme o protocolo recomendado no manual técnico. A concentração e o tempo de incubação devem ser ajustados de acordo com o tipo de amostra e o objetivo experimental.
FAQs
1. A Proteinase K pode ser usada em extração de DNA e RNA?
Sim, ela é amplamente utilizada para remover proteínas durante o isolamento de ácidos nucleicos.
2.Em quais condições a enzima mantém sua atividade?
A Proteinase K é estável em ampla faixa de pH e temperatura, mantendo atividade mesmo em soluções contendo detergentes e agentes desnaturantes.
3.A enzima é sensível à presença de íons metálicos?
Não, sua estrutura contém dois sítios de ligação a Ca²⁺ que aumentam a estabilidade e mantêm a atividade catalítica.
4.Pode ser utilizada em protocolos de diagnóstico in vitro?
Sim, é indicada para desenvolvimento e produção de reagentes enzimáticos na área de diagnóstico molecular.
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