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O princípio do teste aplicado neste kit é o ensaio imunoenzimático tipo sanduíche. A placa de microtitulação fornecida neste kit foi pré-revestida com um anticorpo específico para NS1 do DENV humano. Padrões ou amostras são adicionados aos poços da placa de microtitulação, seguidos por um anticorpo conjugado a biotina específico para NS1 do DENV humano. Em seguida, Avidina conjugada à Peroxidase (HRP) é adicionada a cada poço da placa de microtitulação e incubada. Após a adição da solução de substrato TMB, apenas os poços que contêm NS1 do DENV humano, anticorpo conjugado a biotina e Avidina conjugada a enzima apresentarão uma mudança de cor. A reação enzima-substrato é terminada pela adição de solução de ácido sulfúrico e a mudança de cor é medida espectrofotometricamente em um comprimento de onda de 450nm ± 10nm. A concentração de NS1 do DENV humano nas amostras é então determinada comparando-se a OD das amostras com a curva padrão.